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化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较

罗炜(广州呼吸病研究所)   
王慧 陈柏铭(广州医学院第一附属医院检验科)  

       摘要 本文采用放射免疫法和化学发光免疫法平行测定60例临床送检血清标本的甲胎蛋白(AFP)含量,结果表明两法的相关性良好(r=0.995),但化学发光免疫法的精密度和准确性均优于放射免疫法。   

       关键词 化学发光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白   

       临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法,而近年发展起来的化学发光免疫法因其快速、精确、重现性好及试剂安全无毒的特点,显示出很好的应用前景[1]。为进一步了解化学发光免疫法的特点,本文报告用放射免疫法和化学发光免疫法对比检测60例临床血清标本中AFP的含量,并对结果进行统计分析和比较。  

       材料和方法  

       一、标本 随机抽取60例临床送检血清标本。   

       二、仪器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ计数仪,中国原子能科学研究所的AFP试剂盒。化学发光免疫法使用美国Chiron公司的ACS180全自动化学发光仪和配套试剂盒。其测定原理为以吖啶酯作为发光底物,采用双抗体夹心模式[2],即标本中的AFP抗原与固相中的单克隆AFP抗体结合,再与液相中以吖啶酯标记的多克隆AFP抗体结合。因待测AFP抗原总量与仪器测得的发光单位量(RLUs)存在正比的关系,由此求出AFP的含量。  

       结  果   

       一、线性实验 将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验,结果显示放射免疫法和化学发光免疫法分别在5~400 ng/ml和2~940 ng/ml范围内呈良好的线性关系。  

       二、对比实验 用上述两法同时对受检血清标本进行定量分析。结果表明,两法无显著差异(P>0.05),相关系数r=0.995,直线回归方程Y=-1.058+0.920X,提示两法呈良好相关性。   

       三、回收实验 取不同浓度的混合血清(AFP浓度为18.6,26.7,35.3 ng/ml),分别加入不同浓度的定值血清,用放射免疫法和化学发光免疫法测得的回收率分别为90.2~109.0%和91.0~107.3%,平均回收率为95.7%和96.4%。   

       四、精密度实验 用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验。附表中的结果表明化学发光免疫法的重复性较好。  

附表 两法的精密度对比   

  批内CV% 批间CV%   

放射免疫法 化学发光免疫法 放射免疫法 化学发光免疫法   
低值 5.27 3.20 6.55 3.40   
中值 5.00 2.48 5.30 3.31   
高值 4.50 3.50 5.38 4.71  

       讨  论   

       化学发光免疫技术既具有发光检测的高度敏感性,又具有免疫分析的高度特异性[3]。本文检测AFP结果提示放射免疫法和化学发光免疫法之间无显著差异(P>0.05),相关性好(r=0.995)。显示化学发光免疫法在敏感性、特异性方面不仅可与放射免疫法相媲美,而且化学发光免疫法的准确性、精密度和试剂盒的有效期等方面均优于放射免疫法。由于化学发光免疫法是以化学发光剂作为标记物进行定量检测,所以其试剂具有稳定和无毒性的优点。本实验使用的全自动化学发光仪可以直接对血清标本进行采样,处理和检测,标本可以随到随测,短时间内出结果,较放免法大大缩短了时间,能充分满足临床的需要。因此本文认为,化学发光免疫法可广泛应用于临床项目的检测。    

       参考文献    

       [1]陶义训主编.免疫学和免疫学检验.第二版.北京:人民卫生出版社,1997∶174   
       [2]章谷生.发光分析和发光免疫技术.余传霖等主编.现代医学免疫学.上海:上海医科大学出版社,1999∶716   
       [3]张丽民.化学发光标记及发光免疫分析.基础医学与临床.1995;15(4)∶247   

   
                                                         文章来源;阳光检验

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    化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较

    罗炜(广州呼吸病研究所)   
    王慧 陈柏铭(广州医学院第一附属医院检验科)  

           摘要 本文采用放射免疫法和化学发光免疫法平行测定60例临床送检血清标本的甲胎蛋白(AFP)含量,结果表明两法的相关性良好(r=0.995),但化学发光免疫法的精密度和准确性均优于放射免疫法。   

           关键词 化学发光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白   

           临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法,而近年发展起来的化学发光免疫法因其快速、精确、重现性好及试剂安全无毒的特点,显示出很好的应用前景[1]。为进一步了解化学发光免疫法的特点,本文报告用放射免疫法和化学发光免疫法对比检测60例临床血清标本中AFP的含量,并对结果进行统计分析和比较。  

           材料和方法  

           一、标本 随机抽取60例临床送检血清标本。   

           二、仪器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ计数仪,中国原子能科学研究所的AFP试剂盒。化学发光免疫法使用美国Chiron公司的ACS180全自动化学发光仪和配套试剂盒。其测定原理为以吖啶酯作为发光底物,采用双抗体夹心模式[2],即标本中的AFP抗原与固相中的单克隆AFP抗体结合,再与液相中以吖啶酯标记的多克隆AFP抗体结合。因待测AFP抗原总量与仪器测得的发光单位量(RLUs)存在正比的关系,由此求出AFP的含量。  

           结  果   

           一、线性实验 将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验,结果显示放射免疫法和化学发光免疫法分别在5~400 ng/ml和2~940 ng/ml范围内呈良好的线性关系。  

           二、对比实验 用上述两法同时对受检血清标本进行定量分析。结果表明,两法无显著差异(P>0.05),相关系数r=0.995,直线回归方程Y=-1.058+0.920X,提示两法呈良好相关性。   

           三、回收实验 取不同浓度的混合血清(AFP浓度为18.6,26.7,35.3 ng/ml),分别加入不同浓度的定值血清,用放射免疫法和化学发光免疫法测得的回收率分别为90.2~109.0%和91.0~107.3%,平均回收率为95.7%和96.4%。   

           四、精密度实验 用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验。附表中的结果表明化学发光免疫法的重复性较好。  

    附表 两法的精密度对比   

      批内CV% 批间CV%   

    放射免疫法 化学发光免疫法 放射免疫法 化学发光免疫法   
    低值 5.27 3.20 6.55 3.40   
    中值 5.00 2.48 5.30 3.31   
    高值 4.50 3.50 5.38 4.71  

           讨  论   

           化学发光免疫技术既具有发光检测的高度敏感性,又具有免疫分析的高度特异性[3]。本文检测AFP结果提示放射免疫法和化学发光免疫法之间无显著差异(P>0.05),相关性好(r=0.995)。显示化学发光免疫法在敏感性、特异性方面不仅可与放射免疫法相媲美,而且化学发光免疫法的准确性、精密度和试剂盒的有效期等方面均优于放射免疫法。由于化学发光免疫法是以化学发光剂作为标记物进行定量检测,所以其试剂具有稳定和无毒性的优点。本实验使用的全自动化学发光仪可以直接对血清标本进行采样,处理和检测,标本可以随到随测,短时间内出结果,较放免法大大缩短了时间,能充分满足临床的需要。因此本文认为,化学发光免疫法可广泛应用于临床项目的检测。    

           参考文献    

           [1]陶义训主编.免疫学和免疫学检验.第二版.北京:人民卫生出版社,1997∶174   
           [2]章谷生.发光分析和发光免疫技术.余传霖等主编.现代医学免疫学.上海:上海医科大学出版社,1999∶716   
           [3]张丽民.化学发光标记及发光免疫分析.基础医学与临床.1995;15(4)∶247   

       
                                                             文章来源;阳光检验