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分子诊断正当红,微流控技术助腾飞

QQ截图20170608112502.png

基于PCR的分子诊断是通过引物介导特异性扩增目的基因以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。

 

其主要的应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早期辅助诊断,肿瘤的分子分型,遗传病的诊断,产前诊断,组织分型等。

 

其中在传染病的诊断和血筛方面,基于PCR的分子诊断能缩短诊断的“窗口期”,并且可以定量对病原体进行检测。

 

相比于传统的免疫诊断方式而言,有不可替代的优势。基于PCR的分子诊断往往是医院对传染病诊断的“金标准”。

 

在血筛方面,有数据表明,美国90%以上输血传播HIV和HBV以及75%以上输血HCV的危险性均来自“窗口期”感染献血。

 

在我国,2015 年 2 月,卫计委和财政部联合印发《关于做好血站核酸检测工作的通知》: 全面推进血站核酸检测工作,确保 2015 年血站核酸检测覆盖全国并优先选择国产核酸检测系统及试剂。

A.png

基于PCR的分子诊断分为三步:

核酸的提取和纯化;

核酸在引物约束下特异性地PCR扩增;

扩增产物的检测。

 

在实时荧光定量PCR里,往往PCR扩增和扩增的产物的检测是同时进行的。在医院的临床应用中,往往为了避免交叉污染,往往需要试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。

B.png

在PCR扩增中,核心是温控。主要因为PCR一般需要变性,退火,延伸三个阶段,每个阶段对应需要不同的温度。

 

在实际应用中,往往可以采取两种方式来实现温度的切换:

直接温控,对反应腔进行加热或者降温;

预先设置三个处在不同位置的温区,让反应腔在三个温区之间进行空间上的切换。

 

实际产业化中,往往使用的是直接温控法,即直接升温降温。

 

荧光检测往往是和PCR扩增同时进行的,以实现实时定量的效果。在实际应用中,可以使用不同波段的荧光标记探针来进行荧光定量,从而实现多通道的检测。

4.png

 由于基于PCR的分子诊断的人工操作需要三个实验区,过程费时并且需要专业人员进行操作,整个过程由于人的参与带来许多不可控的因素,所以临床对于全自动的需求高涨。


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    分子诊断正当红,微流控技术助腾飞

    QQ截图20170608112502.png

    基于PCR的分子诊断是通过引物介导特异性扩增目的基因以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。

     

    其主要的应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早期辅助诊断,肿瘤的分子分型,遗传病的诊断,产前诊断,组织分型等。

     

    其中在传染病的诊断和血筛方面,基于PCR的分子诊断能缩短诊断的“窗口期”,并且可以定量对病原体进行检测。

     

    相比于传统的免疫诊断方式而言,有不可替代的优势。基于PCR的分子诊断往往是医院对传染病诊断的“金标准”。

     

    在血筛方面,有数据表明,美国90%以上输血传播HIV和HBV以及75%以上输血HCV的危险性均来自“窗口期”感染献血。

     

    在我国,2015 年 2 月,卫计委和财政部联合印发《关于做好血站核酸检测工作的通知》: 全面推进血站核酸检测工作,确保 2015 年血站核酸检测覆盖全国并优先选择国产核酸检测系统及试剂。

    A.png

    基于PCR的分子诊断分为三步:

    核酸的提取和纯化;

    核酸在引物约束下特异性地PCR扩增;

    扩增产物的检测。

     

    在实时荧光定量PCR里,往往PCR扩增和扩增的产物的检测是同时进行的。在医院的临床应用中,往往为了避免交叉污染,往往需要试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。

    B.png

    在PCR扩增中,核心是温控。主要因为PCR一般需要变性,退火,延伸三个阶段,每个阶段对应需要不同的温度。

     

    在实际应用中,往往可以采取两种方式来实现温度的切换:

    直接温控,对反应腔进行加热或者降温;

    预先设置三个处在不同位置的温区,让反应腔在三个温区之间进行空间上的切换。

     

    实际产业化中,往往使用的是直接温控法,即直接升温降温。

     

    荧光检测往往是和PCR扩增同时进行的,以实现实时定量的效果。在实际应用中,可以使用不同波段的荧光标记探针来进行荧光定量,从而实现多通道的检测。

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     由于基于PCR的分子诊断的人工操作需要三个实验区,过程费时并且需要专业人员进行操作,整个过程由于人的参与带来许多不可控的因素,所以临床对于全自动的需求高涨。