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四款新型流式细胞仪选购比较

    流式细胞分析技术在现代细胞分子生物学研究中起着越来越重要的作用,这种分析技术是通过对单个细胞性状的快速测定,并结合先进的计算机分析系统,使得在短时间内可对大量细胞进行定性、定量测定。但以往进行流式细胞仪操作和分析需要技术熟练的研究团队,而且这一设备价值也不菲——起码也要10万美元,有些甚至达到50万美元,这对于许多实验室来说并不容易负担。
    近年来一些主流生物技术企业相继推出了新型流式细胞仪,不单将原本需要一支工程师队伍进行安装的大型设备压缩成为可以单人运送的紧凑型仪器,并让这一原本需要专人专业培训才能上手的复杂技术变得更加容易操作,而也价格也更加实惠——目前的流式细胞仪分析系统设置大部分都是自动化的, 相关试剂盒也经过了多次验证,简化了操作,降低了入门门槛。一些大型的公司,比如Sony和BD加大了研发力度,开发出了10万美元以下的流式细胞仪,在美国其客户群开始由中心实验室转向了个人实验室。
    虽然简化了操作,但是这些新型的流式细胞仪也不是说就能立即上手的,用户在购买之前要弄清楚这一技术到底能做什么,不能做什么,有时实验室购买了流式细胞仪后觉得又不适用了,这样即浪费资源,也耽误时间,因此了解自己需要什么,了解不同仪器的优缺点十分重要。以下是目前市面上较受关注的几个新型流式细胞仪,通过分析它们的优点和缺点,也许您在选购的时候就更有目的性了。
    代表着流式细胞仪重要创新、市场上第一台用声波精确控制细胞移动的流式细胞计数系统,是一款由美国能源部国家实验室(洛斯阿拉莫斯国家实验室)研制的新型流式细胞分析仪,去年春天由ABI(Life Technologies)公司投入到了市场,不单荣获了The Scientist杂志2010十大创新技术,也被生物通读者投票入选2010年生物通生命科学十大创新产品。
    流式细胞仪的原理在于让细胞逐个穿过激光检测设备,从而使科学家们得以对细胞进行计数和检测。过去,研究人员必须在其灵敏分辨率和样品进样分析速度两者之间二选一,取其平衡点。原因在于传统的流式细胞仪由快速流动的鞘液流带动样品轴流经过激光检测器。要加大样品进样分析速度就必须加大样品轴流直径,这意味着样品流中细胞分散度扩大,细胞容易偏离激光检测焦点——细胞偏离激光中心越远则激发光强度变化越大,CV值越高——这就导致样品分辨率下降——因此过去往往要为灵敏度而牺牲通量。
    Attune声波聚焦流式细胞仪通过一个看似简单的原理——利用超声波(超过2 MHz,类似于医学成像中使用的超声波)将细胞紧密聚集在激光检测点的样品轴流中轴线上,避免细胞随轴流加宽而分散。这种声波聚焦在很大程度上与样品进样流速无关,不论样品流与鞘液流的比例如何,都可以使细胞紧密地聚集于激光检测焦点,避免分散。即使是在高达1 mL/min的高样品流速下,照样可以维持精确的细胞排列——Attune流式细胞仪实现了在高进样流速下的高精确检测,能够同时将速度和分辨率最大化,并在检测点开展cell-by-cell的细胞分析,解决了过去需要在灵敏度和速度之间折中的这个矛盾。所获得的数据CV值低,峰更窄,峰分辨率高,分离更好,且数据更易阐释。
    Attune实现这一切并不需要采用可能伤害细胞的高速或大体积鞘流。由于不受物理鞘液流的限制,因而操作人员可以控制细胞通过激光光路的时间,这就意味着在分析微弱信号时,还可以减慢细胞的流速,延长细胞被照亮的时间,以便采集更多的光量子,从而获得更清楚明确的结果以及更好地分离。高精度进样泵还可完成绝对细胞计数——进一步将费用和样品制备时间降低。
    Attune每次运行可收集高达2,000万个细胞,流速可高达1000 μL/min,比其他细胞仪快10倍以上,且收集速率可在25-1,000 μL/min之间进行调整,4分钟内分析多达4 mL样品!
    显著提高的样品收集速率和高样品量对实验意味着什么?用户能更有效地分析相对稀释的样品,比如干细胞,脑脊液(CSF),或任何细胞数量低的稀有样品,因为样品中的颗粒能在检测点聚集。难收集的样品,如小鼠血液和骨髓、细针穿刺液或细胞少的样品,都可以进行染色然后稀释,而无需清洗或裂解RBC。在样品制备过程中没有发生样品损失,所有珍贵样品都能进行全盘检测。另外全血样品可以省去样品制备,无需清洗和裂解红细胞(RBCs),避免细胞损失和损伤,而不折损数据质量。
    Attune声波聚焦流式细胞仪是405nm紫色激光和488nm蓝色双激光设计,其中紫色激光要比其它一些经济型流式细胞仪中用到的标准激光马力更大,目前Life Technologies也针对这一仪器推出了优化探针,更有利于研究人员实验操作。
    Attune声波聚焦流式细胞仪可帮助科学家们实现对细胞群体中大量异质细胞进行统计学数据的采集,以便研究包括大小、复杂性、表型和健康情况在内的细胞群体参数。Attune的专利技术可让科学家们获得更高的灵敏度,通过增加通量来节约时间,并可用于体积小的样品。
    除此之外,Attune在提供这些升级性能的同时,还凭借紧凑的声学技术而实现了体积小,以及开展实验所需的消耗品量更少等优势。这些独特的特征将有助于实现传统细胞仪系统所无法实现的科研应用,从样品分离制备到微珠为基础的样品分析。
    去年旧版本的Attune并没有安装红色激光——这是一些用户比较喜欢的光源。而且在一些常用的流式细胞分析过程中,样品都是高浓度,低体积的,如果用Attune,还要购买价格稍贵的tag,可能划不来。不过生物通编辑刚刚得到的资料表明,最新版的Attune已经在原有的蓝色/紫色激光基础上新增加了蓝色/红色激光配置,这样就可以根据个人的习惯选择激光配置了。

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    四款新型流式细胞仪选购比较

        流式细胞分析技术在现代细胞分子生物学研究中起着越来越重要的作用,这种分析技术是通过对单个细胞性状的快速测定,并结合先进的计算机分析系统,使得在短时间内可对大量细胞进行定性、定量测定。但以往进行流式细胞仪操作和分析需要技术熟练的研究团队,而且这一设备价值也不菲——起码也要10万美元,有些甚至达到50万美元,这对于许多实验室来说并不容易负担。
        近年来一些主流生物技术企业相继推出了新型流式细胞仪,不单将原本需要一支工程师队伍进行安装的大型设备压缩成为可以单人运送的紧凑型仪器,并让这一原本需要专人专业培训才能上手的复杂技术变得更加容易操作,而也价格也更加实惠——目前的流式细胞仪分析系统设置大部分都是自动化的, 相关试剂盒也经过了多次验证,简化了操作,降低了入门门槛。一些大型的公司,比如Sony和BD加大了研发力度,开发出了10万美元以下的流式细胞仪,在美国其客户群开始由中心实验室转向了个人实验室。
        虽然简化了操作,但是这些新型的流式细胞仪也不是说就能立即上手的,用户在购买之前要弄清楚这一技术到底能做什么,不能做什么,有时实验室购买了流式细胞仪后觉得又不适用了,这样即浪费资源,也耽误时间,因此了解自己需要什么,了解不同仪器的优缺点十分重要。以下是目前市面上较受关注的几个新型流式细胞仪,通过分析它们的优点和缺点,也许您在选购的时候就更有目的性了。
        代表着流式细胞仪重要创新、市场上第一台用声波精确控制细胞移动的流式细胞计数系统,是一款由美国能源部国家实验室(洛斯阿拉莫斯国家实验室)研制的新型流式细胞分析仪,去年春天由ABI(Life Technologies)公司投入到了市场,不单荣获了The Scientist杂志2010十大创新技术,也被生物通读者投票入选2010年生物通生命科学十大创新产品。
        流式细胞仪的原理在于让细胞逐个穿过激光检测设备,从而使科学家们得以对细胞进行计数和检测。过去,研究人员必须在其灵敏分辨率和样品进样分析速度两者之间二选一,取其平衡点。原因在于传统的流式细胞仪由快速流动的鞘液流带动样品轴流经过激光检测器。要加大样品进样分析速度就必须加大样品轴流直径,这意味着样品流中细胞分散度扩大,细胞容易偏离激光检测焦点——细胞偏离激光中心越远则激发光强度变化越大,CV值越高——这就导致样品分辨率下降——因此过去往往要为灵敏度而牺牲通量。
        Attune声波聚焦流式细胞仪通过一个看似简单的原理——利用超声波(超过2 MHz,类似于医学成像中使用的超声波)将细胞紧密聚集在激光检测点的样品轴流中轴线上,避免细胞随轴流加宽而分散。这种声波聚焦在很大程度上与样品进样流速无关,不论样品流与鞘液流的比例如何,都可以使细胞紧密地聚集于激光检测焦点,避免分散。即使是在高达1 mL/min的高样品流速下,照样可以维持精确的细胞排列——Attune流式细胞仪实现了在高进样流速下的高精确检测,能够同时将速度和分辨率最大化,并在检测点开展cell-by-cell的细胞分析,解决了过去需要在灵敏度和速度之间折中的这个矛盾。所获得的数据CV值低,峰更窄,峰分辨率高,分离更好,且数据更易阐释。
        Attune实现这一切并不需要采用可能伤害细胞的高速或大体积鞘流。由于不受物理鞘液流的限制,因而操作人员可以控制细胞通过激光光路的时间,这就意味着在分析微弱信号时,还可以减慢细胞的流速,延长细胞被照亮的时间,以便采集更多的光量子,从而获得更清楚明确的结果以及更好地分离。高精度进样泵还可完成绝对细胞计数——进一步将费用和样品制备时间降低。
        Attune每次运行可收集高达2,000万个细胞,流速可高达1000 μL/min,比其他细胞仪快10倍以上,且收集速率可在25-1,000 μL/min之间进行调整,4分钟内分析多达4 mL样品!
        显著提高的样品收集速率和高样品量对实验意味着什么?用户能更有效地分析相对稀释的样品,比如干细胞,脑脊液(CSF),或任何细胞数量低的稀有样品,因为样品中的颗粒能在检测点聚集。难收集的样品,如小鼠血液和骨髓、细针穿刺液或细胞少的样品,都可以进行染色然后稀释,而无需清洗或裂解RBC。在样品制备过程中没有发生样品损失,所有珍贵样品都能进行全盘检测。另外全血样品可以省去样品制备,无需清洗和裂解红细胞(RBCs),避免细胞损失和损伤,而不折损数据质量。
        Attune声波聚焦流式细胞仪是405nm紫色激光和488nm蓝色双激光设计,其中紫色激光要比其它一些经济型流式细胞仪中用到的标准激光马力更大,目前Life Technologies也针对这一仪器推出了优化探针,更有利于研究人员实验操作。
        Attune声波聚焦流式细胞仪可帮助科学家们实现对细胞群体中大量异质细胞进行统计学数据的采集,以便研究包括大小、复杂性、表型和健康情况在内的细胞群体参数。Attune的专利技术可让科学家们获得更高的灵敏度,通过增加通量来节约时间,并可用于体积小的样品。
        除此之外,Attune在提供这些升级性能的同时,还凭借紧凑的声学技术而实现了体积小,以及开展实验所需的消耗品量更少等优势。这些独特的特征将有助于实现传统细胞仪系统所无法实现的科研应用,从样品分离制备到微珠为基础的样品分析。
        去年旧版本的Attune并没有安装红色激光——这是一些用户比较喜欢的光源。而且在一些常用的流式细胞分析过程中,样品都是高浓度,低体积的,如果用Attune,还要购买价格稍贵的tag,可能划不来。不过生物通编辑刚刚得到的资料表明,最新版的Attune已经在原有的蓝色/紫色激光基础上新增加了蓝色/红色激光配置,这样就可以根据个人的习惯选择激光配置了。